شانکر و سرخشکیدگی گل رز در اثر قارچ Colletotrichum fructicola در ایران

پذیرفته شده برای پوستر
کد مقاله : 1107-25IPPC
نویسندگان
1گروه گیاهپزشکی، داشکده کشاورزی، دانشگاه صنعتی اصفهان
2گروه گیاهپزشکی، داشکده کشاورزی، دانشگاه صنعتی اصفهان، 8415683111، ایران
چکیده
رز (Rosa sp.) به دلیل ارزش‌های زینتی و دارویی، به یکی از پرطرفدارترین گل‌ها، در جهان تبدیل شده که کشت آن روز به روز در حال افزایش است. این گیاه گل‌دار چند ساله، متعلق به خانواده Rosaceae است و کشت آن علاوه بر فضای باز در گلخانه‌ هم انجام می‌شود. نمونه‌هایی با علائم شانکر و سرخشکیدگی از ارقام رز سامورایی و جوملیا ازگلخانه‌های استان چهارمحال و بختیاری جمع‌آوری شد. علائم به صورت سرسیاهی همراه با شانکر‌های فرورفته در مرز بافت سالم و آلوده و ایجاد الگو‌های U شکل روی ساقه به واسطه تشکیل پریتسیوم‌ دیده شد. روی محیط کشت PDA در دمای 25 درجه سلسیوس و شرایط تناوب نوری 12 ساعت تاریکی و 12 ساعت روشنایی در مدت یک هفته پرگنه‌ای با قطر 70میلی‌متری تشکیل شد. میسلیوم‌های هوایی پرگنه‌ای نمدی شکل در مرکز و تخت در حاشیه ایجاد کردند که پس از 10 روز رنگ سفید آن از مرکز پتری به سمت حاشیه به رنگ خاکستری تغییر یافت. پرگنه 50 میلی‌متری روی محیط کشت PCA به صورت مخلوطی از رنگ سفید و خاکستری با تراکم کم‌تری از میسلیوم‌های هوایی نسبت به محیط کشت PDA بود و تنها روی این محیط کشت پریتسیوم مشاهده شد. روی محیط کشت‌‌ OA پرگنه دارای قطری 60 میلی‌متری، به صورت تخت، فاقد میسلیوم‌های هوایی، رنگ آن در مرکز سفید و در حاشیه قهوه‌ای تیره مشاهده شد. میسلیوم‌ها روشن، صاف، منشعب، با دیواره‌ای ضخیم به قطر 6-3 میکرومتر بودند.کنیدیوم‌های تک سلولی به همراه دیواره نازک، روشن، استوانه‌ای، صاف با انتهای گرد، دارای اندازه‌ی 2/16- 2/11 × 4-19/3 میکرومتر و در تعداد زیاد به صورت توده زرد رنگ لعابی شکل در کنیدیوماتا روی محیط کشت SNA تشکیل شدند. اپرسوریوم‌های حاصل از میسلیوم‌ها به رنگ قهوه‌ای روشن تا تیره، چماقی، کروی و تخم مرغی شکل و گاهی اوقات با اشکال متنوع با اندازه‌ی 6/9-8/7 × 7/6-6/5 میکرومتر وجود داشتند. پریتسیوم‌ها به رنگ قهوه‌ای تیره تا روشن،کروی تا گلابی شکل،دارای دیواره ضخیم به همراه موهای حاشیه‌ای، قطری به اندازه 7/105-5/75 و آسکوسپور‌ها روشن، کمی خمیده، صاف، تک سلولی، دارای اندازه 17-13 × 5/4-8/3 میکرومتر بودند. از میسلیوم‌های قارچ DNA استخراج و ناحیه ITS و ژن TUB2 در واکنش زجیره ایی پلیمراز تکیثر و توالی یابی شد. با استفاده از نتایج بدست آمده از ویژگی‌های ریخت شناسی و تجزیه و تحلیل ناحیه‌های ITS و TUB2 جدایه‌های قارچی به عنوان Colletotrichum fructicola شناسایی شدند. برای انجام آزمون -بیماری‌زایی از پرگنه هفت روزه رشد یافته روی محیط کشت PDA سوسپانسیونی با غلظت 106 اسپور در میلی‌لیتر تهیه و به بوته گل رزرقم سامورایی دو ماهه مایه‌زنی گردید. گونه قارچی از علائم نکروتیک دوباره جداسازی شد و اصول کخ به اثبات رسید. بر اساس اطلاعات موجود این اولین گزارش از وقوع بیماری شانکر توسط گونه C. fructicola روی گل رز در دنیا می‌باشد.
کلیدواژه ها
 
Title
Canker and dieback disease of Rose cause by Colletotrichum fructicola in Iran
Authors
Sayed Mahdi Nourbakhsh, Bahram Sharifnabi
Abstract
Rose (Rosa sp.) has become one of the most popular flowers in the world because of its ornamental and medicinal values, and its cultivation is continuously increasing. This perennial flowering plant belongs to the Rosaceae family and is cultivated in greenhouses and open fields. Samples with symptoms of canker and dieback were collected from the varieties of Samurai and Jumelia from greenhouses in the Chaharmahal and Bakhtiari province. The symptoms were observed as a diedack with cankers at the border of healthy and infected tissues and the creation of U-shaped patterns on the stem due to the formation of perithecia. colony formed with a diameter of 70 mm on PDA culture medium at a temperature of 25 °C and a light cycle of 12 h of darkness and 12 h of light for one week. The aerial mycelia formed felt colony in the center and were flat at the periphery. After 10 days, the white color changed to gray from the center of the petri to the periphery. The 50 mm diameter on the PCA culture medium was a mixture of white and gray color with a lower density of aerial mycelium than on the PDA culture medium, and only on this culture medium was the perithecia. On the OA culture medium, the 60 mm-diameter, flat, without aerial mycelium, its color was white in the center and dark brown in the periphery; the mycelia were light, smooth, branched, with a thick wall, 3-6 µm in diameter. Single-celled conidia with thin wall, hyaline, cylindrical, smooth with rounded ends. The size of conidia was 3.19-4 × 11.2-16.2 μm, and large numbers were formed in conidiomata on SNA culture medium. Appressorium from mycelia was light to dark brown in color, club-shaped, spherical, ovoed, and sometimes with various shapes measuring 5.6-6.7 x 7.8-9.6 μm. there were The Perithecia were dark to light brown in color, spherical to pyriform, with a thick wall and covered with hyphal outgrowths, diameter 75.5-105.7 μm, and ascospores were hyaline, slightly curved, smooth, single-celled. had a size of 3.8-4.5 x 13-17 μm. DNA was extracted from the fungal mycelia, and ITS region and TUB2 gene were amplified and sequenced by polymerase chain reaction. Using the results obtained from the morphological characteristics and analysis of the ITS and TUB2 regions, the fungal isolates were identified as Colletotrichum fructicola. To perform the pathogenicity test, a suspension with a concentration of 106 spores per milliliter was prepared from seven-day-old colony grown on PDA culture medium and inoculated into a two-month-old rose. Fungal species were isolated from necrotic symptoms and Koch's postulates were confirmed. To our knowledge, this is the first report of canker disease caused by C. fructicola on roses in the world
Keywords
Identification, molecular, morphological, Pathogenicity, rose