بیماری شانکر ناشی از Neopestalotiopsis clavispora روی گل رز در ایران

پذیرفته شده برای پوستر
کد مقاله : 1108-25IPPC
نویسندگان
1گروه گیاهپزشکی، داشکده کشاورزی، دانشگاه صنعتی اصفهان
2گروه گیاهپزشکی، داشکده کشاورزی، دانشگاه صنعتی اصفهان، 8415683111، ایران
چکیده
رز (Rosa sp.) یک گیاه گل‌دار چند ساله و متعلق به خانواده Rosaceae است. بیش از 200 گونه و بیش از 18000 رقم گل رز وجود دارد و کشت آن هم در فضای باز و هم در شرایط گلخانه‌ای انجام می‌شود. در نمونه‌برداری‌های انجام گرفته از استان اصفهان، طوقه و ساقه‌های آلوده با علائمی همچون شانکر و سر خشکیدگی از ارقام سامورایی و تانجا جمع‌آوری گردید. جدایه‌های قارچی بدست آمده از این نمونه‌ها باعث به وجود آمدن شانکر‌هایی فرورفته با حاشیه‌ای زرد رنگ، روی ساقه گل رز می‌شدند. پرگنه این قارچ در دمای 25 درجه سلسیوس و شرایط تناوب نوری 12 ساعت تاریکی و 12 ساعت روشنایی روی محیط کشت PDA در مدت یک هفته 65 تا 70 میلی‌متر رشد داشت. میسلیوم‌های هوایی باعث تولید پرگنه‌ای سفید رنگ با سطحی موجدار و حاشیه‌ای نامنظم شدند. بعد از گذشت 10 روز در سطح پرگنه آسروول‌هایی سیاه رنگ همراه با توده‌های مخاطی حاوی کنیدیوم تشکیل ‌شد. این جدایه در قسمت پشتی پتری به شکل پرگنه‌ای زرد رنگ همراه با نقاط سیاه رنگ ناشی از تشکیل آسروول‌ها دیده ‌شد. این قارچ دارای کنیدیوم‌هایی دوکی یا گرزی شکل، مستقیم و یا کمی خمیده، پنج سلولی با چهاردیواره‌ی عرضی و با اندازه 27–4/18 × 2/8-3/6 میکرومتر بود. سلول پایه در کنیدیوم، روشن، کشیده و مخروطی شکل همراه با یک زائده روشن به طول 8/6–8/5 میکرومتر است. سه سلول میانی رنگی هستند به طوری که سلول دوم از سمت پایه به رنگ قهوه‌ای روشن، سلول سوم قهوه‌ای تیره و سلول چهارم تیره‌تر دیده شد. سلول رأسی روشن، کوتاه و استوانه‌ای تا مخروطی شکل همراه با 3–2 زائده نخی شکل با طول 5/29–2/19 میکرومتر بود. سلول کنیدیوم‌زا روشن، کوتاه، ساده و نخی شکل دیده شد. به منظور تایید شناسایی مورفولوژیکی، پس از استخراج DNA، نواحی ITS در واکنش زنجیره‌ایی پلیمراز تکثیر و توالی یابی انجام شد. بر اساس نتایج بدست آمده از ویژگی‌های ریخت شناسی و تجزیه و تحلیل ناحیه‌های ITS جدایه‌های قارچی بدست‌آمده، گونه Neopestalotiopsis clavispora شناسایی شدند. به منظور انجام آزمون ‌بیماری‌زایی از پرگنه هفت روزه رشد یافته روی محیط کشت PDA سوسپانسیونی با غلظت 106 اسپور در میلی‌لیتر تهیه شد و به ساقه‌های بوته دو ماهه گل رز رقم تانجا مایه‌زنی گردید. گونه قارچی از علائم نکروتیک دوباره جداسازی شد و اصول کخ به اثبات رسید. بر اساس اطلاعات موجود این اولین گزارش از وقوع بیماری شانکر و سرخشکیدگی توسط گونه N. clavispora روی گل رز در ایران می‌باشد.
کلیدواژه ها
 
Title
Rose canker caused by Neopestalotiopsis clavispora in Iran
Authors
Sayed Mahdi Nourbakhsh, Bahram Sharifnabi
Abstract
Rose (Rosa sp.) is a perennial flowering plant that belongs to the Rosaceae family. There are more than 200 species and more than 18,000 varieties of roses, and their cultivation is performed in both open fields and under greenhouse conditions. In sampling conducted in Isfahan province, diseased crowns and stems with symptoms such as canker and dieback were collected from Samurai and Tanja cultivars. Fungal isolates found from these samples caused sunken cankers with a yellow border on the stem of the rose. The clony of this fungus grew 65 to 70 mm in PDA culture medium at 25 °C and 12 h of darkness and 12 h of light. The aerial mycelia produced white colony with wavy surfaces and irregular margins. After 10 days, black acervuli with slimy spore masses formed on the surface of the petri dish. This isolate was observed in the back part of the Petri dish in the form of a yellow colony with black dots owing to the formation of acervules. Conidia were fusiform to clavate, straight or slightly curved, five-celled, and 4-septate, with a size of 6.3-8.2 x 18.4-27 µm. The basal cell in the condia is bright, elongated and conical with a hyaline appendage 5.8–6.8 µm long. The three median cells were versicoloured with darker walls than the rest of the cells. The second cell from the base was pale brown, the third cell darker brown, and the fourth cell darker. The apical cell was bright, short, and cylindrical to conical with 2-3 apical hyaline appendages of 19.2-29.5 µm. Conidiogenous cells were hyaline, short, simple, and cylindrical. To confirm morphological identification, after DNA extraction, ITS regions were amplified using polymerase chain reaction and sequenced. Based on the results obtained from the morphological characteristics and analysis of the ITS regions of the fungal isolates, Neopestalotiopsis clavispora was identified. To carry out pathogenicity, a suspension was prepared from seven-day-old progeny grown on PDA culture medium with a test of 106 spores per milliliter and inoculated into the stems of two-month-old Tanja digital rose plants. The fungal species were re-isolated from the necrotic symptoms, and Koch's postulates were confirmed. To our knowledge, this is the first report of canker disease and diedack caused by N. clavispora on roses in Iran.
Keywords
Identification, molecular, morphological, Pathogenicity, rose