اولین گزارش قارچها و نماتدهای مرتبط با عارضه زوال درختچه‌های پیراکانتا و روش های کنترل موثر در فضای سبز شهری

پذیرفته شده برای پوستر
کد مقاله : 1247-25IPPC (R1)
نویسندگان
1مرکز تحقیقات آموزش و مشاوره فضای سبز شهرداری منطقه 17 تهران، ایران
2موسسه تحقیقات ثبت و گواهی بذر و نهال، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران
چکیده
پیراکانتا (Pyracantha coccinea) درختچه ای خاردار از گروه گیاهان همیشه سبز می‌باشد که به طور گسترده در سطح فضای سبز شهری کشت می‌شود. در این مطالعه، بهار و تابستان سال 1401 از درختچه‌های پیراکانتا دارای علایم سبزردی، سرخشکیدگی و زوال در سطح بوستان‌های منطقه 17 شهرداری تهران نمونه‌برداری انجام شد. به منظور جداسازی بیمارگر‌های قارچی، قطعاتی از بافت‌ها (ریشه، طوقه، ساقه) پس از شستشو با آب و ضدعفونی سطحی با محلول هیپوکلریت سدیم یک درصد روی محیط های مختلف آگاردار با تناوب نوری 12 ساعت روشنایی و 12 ساعت تاریکی در دمای 1 ± 25 درجه سلسیوس کشت داده شدند. تهیه کشت خالص قارچ‌ها به روش تک اسپور و نوک ریسه کردن روی محیط کشت‌ آب - آگار دو درصدی انجام شد. شناسایی جدایه های قارچی بر اساس خصوصیات ریخت شناختی و کلیدهای شناسایی معتبر انجام و برای تأیید گونه‌های شناسایی‌شده از روش مولکولی بر اساس تعیین توالی نوکلئوتیدی نواحی ITS-rDNA و همچنین بخشی از ژن بتا توبولین استفاده شد. به‌طور کلی از جدایه‌های قارچی جداسازی و شناسایی شده بر اساس ویژگی-های ریخت‌شناختی و مولکولی، دو جدایه متعلق به Fusarium oxysporum و یک جدایه متعلق به Phytophthora ramorum شناسایی شد. همچنین به منظور شناسایی نماتدها، تعدادی نمونه ناحیه ریزوسفر جمع‌آوری و به آزمایشگاه منتقل گردید. نماتدها با استفاده از روش الک و سانتریفیوژ استخراج گردیدند. سپس با گلیسیرین تثبیت و از آن‌ها اسلاید دائمی تهیه و با استفاده از میکروسکوپ نوری مجهز به لوله ترسیم، خصوصیات ریخت‌شناختی و ریخت سنجی آنها مورد بررسی قرار گرفتند. شناسایی گونه‌ها با استفاده از کلیدهای معتبر انجام گرفت. در بررسی اولیه، جمعیت‌هایی از دو گونه نماتدهای مولد زخم ریشهPratylencus coccinea وP. thornei ، و یک جمعیت لارو از جنس Ditylenchusشناسایی گردید. اثبات بیماریزایی عوامل جداسازی شده بر روی درختچه‌های یک ساله پیراکانتا در شرایط گلخانه ای انجام شد. در ادامه این پژوهش به بررسی کنترل این عوامل بیماریزا در سه مکان پایلوت از نظر جغرافیایی انجام شد. تیمارهای آزمایش‌ شامل کود گوگرد با درجه خلوص 80 درصد، ترکیب جدید نماکوب پلاس (استیک اسید گیاهی) و اجرای دوره ای کودگوگرد و نماکوب پلاس در بازه زمانی چهارده روز در دو نوبت انجام شد. نتایج این پژوهش نشان داد گوگرد به میزان 78 درصد و نماکوب پلاس به میزان 83/50 درصد موجب مهار عوامل بیماریزا شده است و تیمار دوره ای گوگرد و نماکوب پلاس به طور کامل موجب مهار عوامل بیماریزایی شده است. بر اساس نتایج بدست آمده می‌توان مصرف تناوبی گوگرد و نماکوب پلاس را بعنوان جایگزین مناسب قارچکش و نماتدکش‌های شیمیایی با حفظ محیط زیست شهری سالم در کنترل بیماری‌های پیراکانتا توصیه کرد.
کلیدواژه ها
 
Title
First report of fungi and nematodes related to the deterioration of pyracantha shrubs and effective control methods in urban green spaces
Authors
Zeynab Keykhosravi, Nima Khaledi, Abbas Rastegar
Abstract
Scarlet firethorn (Pyracantha coccinea), a thorny evergreen shrub, is widely cultivated in urban green spaces. In this research, during the spring and summer of 2021, samples of scarlet firethorn shrub displaying symptoms of chlorosis, dieback and decline were collected from the parks located at 17th district of Tehran Municipality. For the isolation and identification of pathogenic fungi, pieces of infected tissues (Root, crown, stem) after washing with water and surface sterilization with 1% sodium hypochlorite solution were placed on different agar media with alternating 12 hours light and 12 hours darkness at 25 ± 1 °C. Purification of fungal colonies was performed using single spore and hyphal tip methods on 2% water agar medium. The fungal isolates were identified based on morphological characteristics and valid identification keys. To confirm species identification, molecular identification based on the ITS-rDNA and partial β-tubulin gene sequences was conducted. In general, from fungal isolates recovered, two isolate belonged to Fusarium oxysporum and one isolate belonged to Phytophthora ramorum. In order to identify nematodes, a number of rhizosphere samples were collected and transferred to the laboratory. The nematodes were extracted by sieving and centrifugation method, then fixed with glycerin, and permanent microscopic slides were prepared. The morphological and morphometric properties were examined using a light microscope equipped with a drawing tube. Species were identified using valid keys. In the initial study, several populations of two species of lesion nematodes (Pratylencus coccinea and P. thornei) and one population of larvae of Ditylenchus were identified. The pathogenicity of the isolated agents was confirmed on one-year-old scarlet firethorn shrubs under greenhouse conditions. The control of these pathogenic agents was carried out in three pilot locations from a geographical point of view. The experimental treatments included sulfur fertilizer with a purity of 80%, a new combination of Nemakoub Plus (Vegetable acetic acid), and periodic application of sulfur and Nemakoub Plus in a period of fourteen days in two times. The results of this research showed that sulfur inhibited the pathogenic agents by 78% and Nemakoub Plus by 83.50%, and periodic treatment of sulfur fertilizer and Nemakoub Plus completely inhibited pathogenic agents. Based on the obtained results, periodic use of sulfur and Nemakoub Plus can be recommended as a suitable alternative to chemical fungicides and nematicides while maintaining a healthy urban environment in controlling scarlet firethorn diseases.
Keywords
Pathogenicity, Identification, biological control, sulfur, Nemakoub Plus