بررسی فلور باکتریایی لولهی گوارش لارو برگخوار پاییزه ذرت Spodoptera frugiperda (Lepidoptera, Noctuidae) بر اساس خصوصیات بیوشیمیایی و تستهای افتراقی
پذیرفته شده برای ارائه شفاهی
کد مقاله : 1378-25IPPC (R1)
نویسندگان
1دانشگاه زابل دانشکده کشاورزی گروه گیاهپزشکی دانشجوی مقطع دکتری
2دانشیار حشره شناسی کشاورزی، گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه زابل،
3دانشیار حشره شناسی کشاورزی گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه زابل
چکیده
چکیده
همزیستهای میکروبی نقش مهمی در بیولوژی و بقای حشرات داشته و از اهداف بالقوه برای کنترل آفات از طریق اختلال در این رابطهی همزیستی هستند. برگخوار پاییزه ذرت, ,Spodoptera frugiperda که تا پیش از این جزء آفات قرنطینهی خارجی محسوب میشده، برای اولینبار از مزارع ذرت شهرستان ارزوئیه واقع در استان کرمان، در شهریور و مهر ماه سال ۱۴۰۲ گزارش شده است. هدف از این تحقیق بررسی فلور میکروبی لولهی گوارش لارو برگخوار پاییزه ذرت با استفاده از تکنیکهای مورفولوژیک و تستهای افتراقی به روش بیوشیمیایی است. تخم و لارو حشره از مزارع ذرت شهرستان جیرفت جمعآوری و در شرایط آزمایشگاهی در دمای ۲±۲۷ درجه سلسیوس، رطوبت نسبی ۵±۶۵ درصد و دوره نوری ۱۲ ساعت روشنایی، پرورش و پس از تشکیل کلنی از لاروهای سن ۳تا ۵ برای بررسی استفاده شد. محتویات لوله گوارش لارو حشره در محیط کشت آگار مغذی (نوترینت آگار) به روش۱۶ تایی خطی برای وجود و عدم وجود باکتریها کشت داده شدند و پس از خالصسازی در محیط کشتهای اختصاصی، از تستهای بیوشیمیایی و افتراقی,Urease ,Oxidase ,Citrate ,Catalase ,SCA ,MR-VP ,TSI MSA و SIM استفاده شد. تراکم باکتریها اندازهگیری و رنگ آمیزی گِرَم انجام گرفت و بررسی ظاهر کلنیها با توجه به ویژگیهای خاصی مانند اندازه، شکل، رنگ، برآمدگی، قوام و شفافیت صورت گرفت. در نتیجهی بررسی های بیوشیمیایی گونه Escherichia coli و جنسهای Salmonella , Kelebsiella ,Staphylococcus و Bacillus شناسایی شدند. از آنجاییکه باکتریهای همزیست نقش مهمی در بیولوژی حشرات دارند، حذف این همزیستها میتواند در زندهمانی و رشد جمعیت حشره اثر سوء داشته باشد.
همزیستهای میکروبی نقش مهمی در بیولوژی و بقای حشرات داشته و از اهداف بالقوه برای کنترل آفات از طریق اختلال در این رابطهی همزیستی هستند. برگخوار پاییزه ذرت, ,Spodoptera frugiperda که تا پیش از این جزء آفات قرنطینهی خارجی محسوب میشده، برای اولینبار از مزارع ذرت شهرستان ارزوئیه واقع در استان کرمان، در شهریور و مهر ماه سال ۱۴۰۲ گزارش شده است. هدف از این تحقیق بررسی فلور میکروبی لولهی گوارش لارو برگخوار پاییزه ذرت با استفاده از تکنیکهای مورفولوژیک و تستهای افتراقی به روش بیوشیمیایی است. تخم و لارو حشره از مزارع ذرت شهرستان جیرفت جمعآوری و در شرایط آزمایشگاهی در دمای ۲±۲۷ درجه سلسیوس، رطوبت نسبی ۵±۶۵ درصد و دوره نوری ۱۲ ساعت روشنایی، پرورش و پس از تشکیل کلنی از لاروهای سن ۳تا ۵ برای بررسی استفاده شد. محتویات لوله گوارش لارو حشره در محیط کشت آگار مغذی (نوترینت آگار) به روش۱۶ تایی خطی برای وجود و عدم وجود باکتریها کشت داده شدند و پس از خالصسازی در محیط کشتهای اختصاصی، از تستهای بیوشیمیایی و افتراقی,Urease ,Oxidase ,Citrate ,Catalase ,SCA ,MR-VP ,TSI MSA و SIM استفاده شد. تراکم باکتریها اندازهگیری و رنگ آمیزی گِرَم انجام گرفت و بررسی ظاهر کلنیها با توجه به ویژگیهای خاصی مانند اندازه، شکل، رنگ، برآمدگی، قوام و شفافیت صورت گرفت. در نتیجهی بررسی های بیوشیمیایی گونه Escherichia coli و جنسهای Salmonella , Kelebsiella ,Staphylococcus و Bacillus شناسایی شدند. از آنجاییکه باکتریهای همزیست نقش مهمی در بیولوژی حشرات دارند، حذف این همزیستها میتواند در زندهمانی و رشد جمعیت حشره اثر سوء داشته باشد.
کلیدواژه ها
Title
Bacterial flora of the alimentary canal of Spodoptera frugiperda (Lepidoptera, Noctuidae) based on biochemical and differential characteristics
Authors
Motahareh amiridomari, abbas khani, najmeh sahebzadeh
Abstract
Abstract
Microbial symbionts play an important role in the biology and survival of insects and are potential targets for pest control by disrupting this symbiotic relationship. The fall armyworm, Spodoptera frugiperda, which was previously considered an external quarantine pest in Iran, is being reported from some corn fields in the Orzuiye region, Kerman Province, in October 2023 for the first time. The purpose of this research is to investigate the microbial flora of the digestive tube of the fall armyworm larvae, using morphological techniques and differential tests by biochemical methods. Eggs and larvae were collected from the corn fields of Jiroft, Kerman and reared in laboratory conditions at a temperature of 27 ± 2 °C, relative humidity of 65 ± 5% and a photoperiod of 12L:12D. After colony formation, the third to fifth instar larvae were used for investigation. The contents of the digestive tube of larvae were cultured in Nutrient Agar culture medium by 16 linear method, and after purification,in special cultures, from biochemical and differential tests, Citrate, Oxidase, Urease, Catalase, Simmons Citrate agar )SCA (, Triple Sugar Iron Agar)TSI(, Methyl Red/Ves-Proskauer (MR-VP) and Mannitol Salt Agar (MSA) and Sulfur Indole Motility Media (SIM), were used.The density of bacteria was measured, and Gram staining was performed. The appearance of the colonies was examined according to certain characteristics such as size and form, color, elevation, consistency and opacity. As a result of the biochemical investigation, Escherichia coli and Salmonella, Kelebsiella, Staphylococcus and Bacillus genera were identified. Since symbiotic bacteria play an important role in insect biology, removing these symbiotic bacteria can have a negative effect on the survival and growth of the insect population.
Microbial symbionts play an important role in the biology and survival of insects and are potential targets for pest control by disrupting this symbiotic relationship. The fall armyworm, Spodoptera frugiperda, which was previously considered an external quarantine pest in Iran, is being reported from some corn fields in the Orzuiye region, Kerman Province, in October 2023 for the first time. The purpose of this research is to investigate the microbial flora of the digestive tube of the fall armyworm larvae, using morphological techniques and differential tests by biochemical methods. Eggs and larvae were collected from the corn fields of Jiroft, Kerman and reared in laboratory conditions at a temperature of 27 ± 2 °C, relative humidity of 65 ± 5% and a photoperiod of 12L:12D. After colony formation, the third to fifth instar larvae were used for investigation. The contents of the digestive tube of larvae were cultured in Nutrient Agar culture medium by 16 linear method, and after purification,in special cultures, from biochemical and differential tests, Citrate, Oxidase, Urease, Catalase, Simmons Citrate agar )SCA (, Triple Sugar Iron Agar)TSI(, Methyl Red/Ves-Proskauer (MR-VP) and Mannitol Salt Agar (MSA) and Sulfur Indole Motility Media (SIM), were used.The density of bacteria was measured, and Gram staining was performed. The appearance of the colonies was examined according to certain characteristics such as size and form, color, elevation, consistency and opacity. As a result of the biochemical investigation, Escherichia coli and Salmonella, Kelebsiella, Staphylococcus and Bacillus genera were identified. Since symbiotic bacteria play an important role in insect biology, removing these symbiotic bacteria can have a negative effect on the survival and growth of the insect population.
Keywords
Bacillus, microbial flora, Biology, Symbiotic bacteria