مطالعه تاثیر توکسین های جدایه های Alternaria برگیاه آفتابگردان و گوجه فرنگی

پذیرفته شده برای پوستر
کد مقاله : 1437-25IPPC
نویسندگان
گروه بیماری شناسی گیاهی، دپارتمان کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران
چکیده
قارچ بیمارگر Alternaria spp. به عنوان یکی از مهمترین پاتوژنهای گیاهی محسوب میشود که باعث ایجاد بیماری در بسیاری از گیاهان میشود. مایکوتوکسینها که به عنوان متابولیت های ثانویه قارچی با وزن ملکولی پایین و ساختارهای شیمیایی پیچیده شناخته میشوند، توسط بسیاری از قارچ های بیمارگر گیاهی تولید میشوند. این متابولیتها بر بیماریزایی قارچها بر گیاهان موثر هستند. این مطالعه با هدف بررسی اثر مایکوتوکسین های برخی از جدایه های بیمارگر Alternaria spp.جداشده از خاک بر روی گیاهان آفتابگردان و گوجه فرنگی انجام شد. شناسایی جدایه های آلترناریا که با استفاده از محیط زاپک جداسازی شده بودند، با روشهای مرفولوژیکی و ملکولی انجام شد. به منظور تولید توکسین، پاتوژن در محیط کشت PDB کشت داده شد و به مدت سه هفته در دمای 25 درجه سانتیگراد نگهداری شد. بعد از حذف قارچ از محیط کشت، با استفاده از سانتریفیوژ و افزودن کلروفرم- استون به نسبت 80 به 20 توکسین مورد نظر استخراج گردید. یک محلول دو فازی که فاز پایینی آن شامل کلروفرم- استون بود. فاز کلروفرم ته نشین شده استخراج و به درون شیشه های منتقل گردید تا در مجاورت با هوا، کلروفرم آن تبخیر گردد. برای شناسایی مایکوتوکسینها از روش HPLC (کروماتوگرافی با کارایی بالا) استفاده گردید. سپس 1CC آب مقطر به ماده خشک اضافه شد و با تزریق به درون برگ، تاثیر آن بر روی گیاهان مذکور بررسی شد. بر اساس خصوصیات مرفولوژیکی و ملکولی جدایه های تولید کننده توکسین همگی متعلق به Alternaria spp. بودند که توکسین های Tenuazonic acid (TEA)، Tentoxin (TTX) و Altenune (ALT) را تولید کردند. توکسین های تزریق شده به بافت آفتابگردان بعد از گذشت 6 روز منجر به ایجاد کلروز و نکروز در بافت برگ گیاه شدند اما علائم بر گیاهان گوجه فرنگی بعد از سه روز قابل مشاهده بود.
کلیدواژه ها
 
Title
Investigating the effect of toxins of Alternaria spp. isolates on sunflower and tomato plants
Authors
Nazyar Zandyavari
Abstract
Alternaria spp. is considered one of the most important plant pathogens that causes disease in many crops and ornamental plants. Mycotoxins, known as fungal secondary metabolites with low molecular weight and complex chemical structures, are produced by many plant-pathogenic fungi. These metabolites are effective on the pathogenicity of fungi in plants. This study was conducted to investigate the effect of mycotoxins on some pathogenic isolates of Alternaria spp. and isolated from soil on sunflower and tomato. Identification of Alternaria isolates that were isolated using the Zapek medium was done by morphological and molecular methods. To produce toxin, the pathogen was cultured in a PDB medium and incubated at 25°C for three weeks. After removing the fungus from the media, the toxin was extracted by using a centrifuge and adding chloroform-acetone in a ratio of 80:20. A two-phase solution was formed, the lower phase of which contained chloroform-acetone, and this phase was used to continue the study. The precipitated chloroform phase was extracted and transferred into other dishes so that its chloroform evaporated. HPLC method (high-performance chromatography) was used to identify mycotoxins. Then 1 CC of distilled water was added to the dry material and its effect on the mentioned plants was checked by injecting it into the leaves. Based on the morphological and molecular characteristics, the toxin-producing isolates all belonged to Alternaria spp., which produced Tenuazonic acid (TEA), Tentoxin (TTX), and Altenune (ALT) toxins. Toxins injected into sunflower tissue after 6 days led to chlorosis and necrosis in plant leaf tissue, but symptoms were visible on tomato plants after three days.
Keywords
HPLC, Tenuazonic acid (TEA), Altenune (ALT), Tentoxin (TTX)