قارچ های اندوفیت گلرنگ در ایران

پذیرفته شده برای پوستر
کد مقاله : 1448-25IPPC
نویسندگان
1دانشجوی ارشد رشته بیماری شناسی گیاهی دانشگاه صنعتی اصفهان
2دانشگاه صنعتی اصفهان
چکیده
گلرنگ Carthamus tinctorius L.)) گیاهی یک ساله و متعلق به خانواده Asteraceae است. این گیاه ، یک گیاه صنعتی است که برای تهیه روغن و رنگ‌های خوراکی استفاده می شود. در این پژوهش، واکاوی قارچ های اندوفیت گلرنگ در استان استان روی رقم کوسه انجام شد. در طی نمونه‌برداری‌های انجام گرفته از مزارع استان‌ اصفهان، قارچی از برگ‌های سالم و بدون علائم بیماری گلرنگ جداسازی شد. پرگنه این قارچ در در شرایط تناوب دمایی 25 درجه سلسیوس(روز) و 20 درجه سلسیوس (شب) و شرایط تناوب نوری 12 ساعت تاریکی و 12 ساعت روشنایی روی محیط کشت PDA در مدت یک هفته 78 میلی‌متر رشد داشت. پرگنه‌ قارچ سفید رنگ با میسلیوم هوایی بود که از سطح زیری پتری بصورت رنگ نخودی رنگ با مرکز قهوه‌ای مشاهده شد. این جدایه روی محیط کشت CLA تحت نور NUV اسپورودوکیوم‌های کرمی رنگ تولید نمود. روی محیط کشت CLA ماکروکنیدیوم‌های روشن داسی شکل به اندازه‌ی 4/36-29× 4/6-5/1 میکرومتر با سه تا پنج دیواره تولید کرد. کلامیدوسپورهای کروی و بیضوی بصورت تکی‌، جفتی یا زنجیره‌ای تشکیل، میکروکنیدیوم‌ها یک یا دو سلولی تخم مرغی یا قلوه ای شکل با اندازه 9/14-2/10 × 8/4-5/3 میکرومتر و در سرهای دروغی تولید گردید. کنیدیوفور‌ها ساده و بلند با طول 7/69-5/59 میکرومتر مشاهده شد. گونه قارچ Fusarium falciforme شناسایی شد. این گونه به واسطه داشتن مشخصات مورفولوژیکی منحصر‌به فردی همچون مونوفیالید بلند و داشتن Slime ball از سایرگونه‌های جنس Fusarium متمایز می‌شود. به منظور تایید شناسایی مورفولوژیکی، پس از استخراج DNA، نواحی ITS و TEF در واکنش زنجیره ای پلیمراز تکثیر و توالی یابی انجام شد. بر اساس نتایج بدست آمده از ویژگی‌های ریخت شناسی و تجزیه و تحلیل ناحیه‌هایITS و TEFجدایه‌ی قارچی بدست آمده، گونه F. falciforme شناسایی شد. به منظور انجام آزمون ‌بیماری‌زایی از پرگنه هفت روزه رشد یافته روی محیط کشت PDA‌ سوسپانسیونی به غلظت 106 اسپور در میلی‌لیتر تهیه شد و به بوته گلرنگ رقم کوسه 50 روزه مایه‌زنی گردید. گونه قارچی از برگ بدون علائم دوباره جداسازی شد و اصول کخ به اثبات رسید. بر اساس اطلاعات موجود این اولین گزارش از وجود قارچ اندوفیتF. falciforme از گلرنگ در دنیا می‌باشد.
کلیدواژه ها
 
Title
Endophytic fungi of safflower in Iran
Authors
Fatemeh Mostafaei, Bahram Sharifnabi
Abstract
Safflower (Carthamus tinctorius L.) is an annual plant belongs to the Asteraceae family. Safflower is one of the industrial plants that is cultivated for seed oil and eatable color. The aim of this research was to investigate on endophytic fungi of safflower in Iran. Sampling was done on Kose cultivar safflower from fields in Isfahan province (Khorzouk city). The fungal species was isolated from safflower healthy leaves without symptoms of disease. The clony of this fungus grew 78 mm on the PDA culture medium in temperature alternating conditions of 25 degrees Celsius (day) and 20 degrees Celsius (night) and light alternating conditions of 12 hours of darkness and 12 hours of light in one week. Colony of this fangus have a white aerial mycelium, which was observed from the lower surface of the petri as light yellow color with a brown center. The isolate produces cream-colored sporodochia on CLA culture medium under NUV light. On CLA, it produces falciform hyaline macroconidia with a size of 4.5-6.4 × 29-36.4 micrometers with three to five septate. It forms spherical and oval chlamydospores singly, in pairs or in chains, microconidia are ovoid or kidney-shaped with one or two cells with a size of 3.5-4.8 × 10.2-14.9 micrometers and are produced in false heads. Simple and long conidiophores with a length of 59.5-69.7 micrometers were observed. The fungal species was identified as Fusarium falciforme and is separated from other species of Fusarium by having unique morphological characteristics such as long monophialid and slime ball. In order to confirm morphological identification, after DNA extraction, ITS and TEF regions were amplified and sequenced. Based on the results obtained from the morphological characteristics and analysis of the TEF and ITS regions of the obtained fungal isolate, F. falciforme was identified. To carry out pathogenicity test, a suspension with a concentration of 10⁶ spores per milliliter was prepared from the seven-day-old culture grown on the PDA and inoculated into the 50-day-old safflower plant of Kose variety. The fungal species was re-isolated from the symptomless leaf and Koch's pustulate was proved. According to the available information, this is the first report of the endophytic fungus F. falciforme in safflower in the world.
Keywords
safflower, endophyte, Identification, molecular, morphological