جداسازی و شناسایی Beauveria pseudobassiana از شهرستان خرمآباد براساس ویژگیهای مورفولوژی و مولکولی
پذیرفته شده برای پوستر
کد مقاله : 1704-25IPPC
نویسندگان
1دانشجوی دکتری دانشگاه لرستان
2دانشیار گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه لرستان
چکیده
قارچهای اندوفیت (EF) میتوانند هم رشد گیاه و هم موانع دفاعی در برابر آفات و عوامل بیماریزا را تقویت کنند و به کاهش مصرف آفتکشها و کودهای شیمیایی در کشاورزی کمک کنند. جنس Beauveria (Bals.) Vuill. یک قارچ بیمارگر حشرات با پراکنش جهانی است که در انواع زیستگاهها و اکوسیستمها از جمله حشرات، خاک و گیاهان گزارش شده است. مطالعات فیلوژنتیک اخیر نشان داده که Beauveria دارای تنوع ژنتیکی زیاد و مجموعهای است که از تعدادی گونه مرموز تشکیل شده است. در حال حاضر 21 گونه از این جنس وجود دارد. در این مطالعه از نمونههای خاک جمعآوری شده از ریزوسفر بلوط شهرستان خرمآباد چند جدایهBeauveria با استفاده از محیط کشت اختصاصی به دست آمد. پس از جداسازی و خالصسازی، شناسایی براساس ویژگیهای ریختشناسی، ریختسنجی و همچینن آنالیز تبارشناختی با تکثیر ناحیه ITS-rDNA با استفاده از آغازگرهای ITS1 و ITS4 صورت گرفت. بر اساس دادههای به دست آمده از مشاهدات مورفولوژیکی از جمله شعاع پرگنه پس از 10 روز در دمای 25 درجه سانتیگراد در محیط کشت PDA، (45 میلیمتر)، رنگ پرگنه در محیط کشت PDA، حاشیه سفید با تغییر رنگ داخلی به سفید متمایل به زرد یا زرد کم رنگ، پشت پرگنه بدون رنگ یا سفید مایل به زرد، بوی نامشخص، قطر هیف اصلی (1-2 میکرومتر)، فیالیدها نیمهکروی تا آمپولی شکل با عرض 3-6 میکرومتر، کنیدیها عمدتاً نیمهکروی یا به طور گسترده بیضی شکل، 4/2-2/2 ×5/2-5/2 میکرومتر، دیوارهها نازک و صاف بودند. همچنین مقایسه توالیهای بدست آمده با توالیهای متناظر در بانک ژن با 98- 100 درصد تشابه و تجزیه و تحلیل فیلوژنتیکی، هویت جدایههای مورد مطالعه قارچBeauveria Pseudobassiana تعیین گردید.
کلیدواژه ها
Title
Isolation and identification of Beauveria pseudobassiana from Khorramabad county based on morphological and molecular characteristics
Authors
Zahra Mirzaeipour, Eidi Bazgir
Abstract
Endophytic fungi (EF) can enhance both plant growth and defense barriers against pests and pathogens, contributing to the reduction of chemical pesticides and fertilizers use in agriculture. The genus Beauveria (Bals.) Vuill. is a entomopathogenic fungus with global distribution which recorded in various kinds of habitats and ecosystems including insects, soil and plants. Recent phylogenetic studies indicated that Beauveria showed a lot of genetic diversity and a complex that consists of a number of cryptic species. Currently, there are totally 21 species included in the genus. In this study, several Beauveria isolates were obtained from the soil samples collected from the Oak rhizosphere of Khorramabad county using a special culture media. After isolation and purification, identification was done based on a combination of morphological, morphometric and phylogenetic analysis with amplification of ITS-rDNA using ITS1 and ITS4 primers. Based on data obtained from the morphological observations viz. colony growth rate after 7 days at 25 ºC on PDA, (45 mm), the colony color on the PDA culture media, margin white with interior white color or changing to yellowish white color to pale yellow, Colony reverse uncolored or yellowish white, Odor indistinct, the diameter of the main hyphae (1-2 µm), phialides subspherical to ampulliform with 3–6 µm wide, conidia primarily subglobose or broadly ellipsoid, 2.2-2.5×2.5-2.7 µm, thin and smooth-walled. Also, comparing the sequence obtained with corresponding sequences in the GenBank, with 98-100% similarity and phylogenetic analysis, the identity of isolates was determined as Beauveria pseudobassiana.
Keywords
entomopathogenic fungus, morphology, ITS, Phylogeny