جداسازی و شناسایی Beauveria pseudobassiana از شهرستان خرم‎آباد براساس ویژگی‎های مورفولوژی و مولکولی

پذیرفته شده برای پوستر
کد مقاله : 1704-25IPPC
نویسندگان
1دانشجوی دکتری دانشگاه لرستان
2دانشیار گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه لرستان
چکیده
قارچ‌های اندوفیت (EF) می‌توانند هم رشد گیاه و هم موانع دفاعی در برابر آفات و عوامل بیماری‌زا را تقویت کنند و به کاهش مصرف آفت‌کش‌ها و کودهای شیمیایی در کشاورزی کمک کنند. جنس Beauveria (Bals.) Vuill. یک قارچ بیمارگر حشرات با پراکنش جهانی است که در انواع زیستگاه‎ها و اکوسیستم‎ها از جمله حشرات، خاک و گیاهان گزارش شده است. مطالعات فیلوژنتیک اخیر نشان داده که Beauveria دارای تنوع ژنتیکی زیاد و مجموعه‎ای است که از تعدادی گونه مرموز تشکیل شده است. در حال حاضر 21 گونه از این جنس وجود دارد. در این مطالعه از نمونه‎های خاک‎ جمع‎آوری شده از ریزوسفر بلوط شهرستان خرم‎آباد چند جدایهBeauveria با استفاده از محیط کشت اختصاصی به دست آمد. پس از جداسازی و خالص‎سازی، شناسایی براساس ویژگی‎های ریخت‌شناسی، ریخت‎سنجی و همچینن آنالیز تبارشناختی با تکثیر ناحیه ITS-rDNA با استفاده از آغازگرهای ITS1 و ITS4 صورت گرفت. بر اساس داده‎های به دست آمده از مشاهدات مورفولوژیکی از جمله شعاع پرگنه پس از 10 روز در دمای 25 درجه سانتی‎گراد در محیط کشت PDA، (45 میلی‎متر)، رنگ پرگنه در محیط کشت PDA، حاشیه سفید با تغییر رنگ داخلی به سفید متمایل به زرد یا زرد کم رنگ، پشت پرگنه بدون رنگ یا سفید مایل به زرد، بوی نامشخص، قطر هیف اصلی (1-2 میکرومتر)، فیالیدها نیمه‎کروی تا آمپولی شکل با عرض 3-6 میکرومتر، کنیدی‎ها عمدتاً نیمه‎کروی یا به طور گسترده بیضی شکل، 4/2-2/2 ×5/2-5/2 میکرومتر، دیواره‎ها نازک و صاف بودند. همچنین مقایسه توالی‎های بدست آمده با توالی‎های متناظر در بانک ژن با 98- 100 درصد تشابه و تجزیه و تحلیل فیلوژنتیکی، هویت جدایه‎های مورد مطالعه قارچBeauveria Pseudobassiana تعیین گردید.
کلیدواژه ها
 
Title
Isolation and identification of Beauveria pseudobassiana from Khorramabad county based on morphological and molecular characteristics
Authors
Zahra Mirzaeipour, Eidi Bazgir
Abstract
Endophytic fungi (EF) can enhance both plant growth and defense barriers against pests and pathogens, contributing to the reduction of chemical pesticides and fertilizers use in agriculture. The genus Beauveria (Bals.) Vuill. is a entomopathogenic fungus with global distribution which recorded in various kinds of habitats and ecosystems including insects, soil and plants. Recent phylogenetic studies indicated that Beauveria showed a lot of genetic diversity and a complex that consists of a number of cryptic species. Currently, there are totally 21 species included in the genus. In this study, several Beauveria isolates were obtained from the soil samples collected from the Oak rhizosphere of Khorramabad county using a special culture media. After isolation and purification, identification was done based on a combination of morphological, morphometric and phylogenetic analysis with amplification of ITS-rDNA using ITS1 and ITS4 primers. Based on data obtained from the morphological observations viz. colony growth rate after 7 days at 25 ºC on PDA, (45 mm), the colony color on the PDA culture media, margin white with interior white color or changing to yellowish white color to pale yellow, Colony reverse uncolored or yellowish white, Odor indistinct, the diameter of the main hyphae (1-2 µm), phialides subspherical to ampulliform with 3–6 µm wide, conidia primarily subglobose or broadly ellipsoid, 2.2-2.5×2.5-2.7 µm, thin and smooth-walled. Also, comparing the sequence obtained with corresponding sequences in the GenBank, with 98-100% similarity and phylogenetic analysis, the identity of isolates was determined as Beauveria pseudobassiana.
Keywords
entomopathogenic fungus, morphology, ITS, Phylogeny