ردیابی و تحلیل تبارزائی ویروس کوتولگی گوجه (Prune dwarf virus) از درختان گیلاس استان خراسان رضوی

پذیرفته شده برای پوستر
کد مقاله : 1727-25IPPC (R1)
نویسندگان
1استادیار پژوهش، بخش تحقیقات گیاه‌پزشکی، مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی استان خراسان رضوی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، مشهد، ایران
2- دانشیار، بخش تحقیقات علوم زراعی و باغی، مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی خراسان رضوی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، مشهد، ایران
3- دانش آموخته دکتری، گروه علوم باغبانی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد، خراسان رضوی، ایران
4عضو هیات علمی مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی خراسان رضوی
چکیده
ویروس کوتولگی گوجه (Prune dwarf virus, PDV) از جنس Ilarvirus و خانوادۀ Bromoviridae به‌عنوان یک عامل بیماری‌زای مهم در درختان گیلاس (Prunus avium L.) شناخته شده است و خسارت جدی به درختان هسته‌دار وارد می‌کند. در بهار سال 1401 نمونه‌برداری از مجموعه درختان باغ گیلاس ایستگاه تحقیقات گلمکان مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی خراسان رضوی، انجام شد. نمونه‌های جمع‌آوری‌شده دارای علائم کوتولگی، میوه‌های لکه‌دار، کاهش رشد جوانه‌ها بودند و فاصلۀ میانگره‌های شاخه نسبت به گیاهان سالم کمتر بود. برای ردیابی ویروس از آزمون ترانویسی معکوس از آغازگرهای اختصاصی مبتنی برتوالی نوکلئوتیدی ژن پروتئین حرکتی ویروس (MP) استفاده شد. الکتروفورز حاصله بیانگر تکثیر قطعۀ 756 نوکلئوتیدی جدایه گلمکان بود که پس از خالص‌سازی، توالی‌یابی شد. ترادف‌ به‌دست‌آمده با استفاده از نرم‌افزار بلاست در پایگاه NCBI با ترادف‌های موجود در بانک ژن مقایسه شد و بیشترین میزان یکسانی نوکلدوتیدی را با جدایه بلغارستان (%7/99MT152176, ) و کمترین شباهت را با جدایه هلند (%8/88HM021231, ) نشان داد. درخت تبارزائی بر پایۀ MP ترسیم شد و بر اساس آن، جدایه‌های PDV در دو گروه مجزا قرار گرفتند که جدایه‌ گلمکان در گروه I درخت فیلوژنتیکی قرار گرفت. مقایسه توالی پروتئین حرکتی جدایه‌های ویروس نشان داد توالی‌های اسیدآمینه پروتئین حرکتی و دامنه اتصال این پروتئین به RNA پروتئین حرکتی در میان جدایه‌های ویروس کوتولگی گوجه بسیار حفاظت ‌شده است. در این پژوهش، برای اولین بار توالی ژن MP ویروس کوتولگی گوجه از ایران از باغ گیلاس گلمکان در ‌بانک‌ژن با رس‌شماره OR541106 ثبت و تبارزائی ویروس کوتولگی گوجه با تمرکز بر ژن پروتئین حرکتی مورد بررسی قرار گرفت.
کلیدواژه ها
 
Title
Detection and phylogenetic analysis of prune dwarf virus from cherry trees in Razavi Khorasan Province
Authors
Sara Gharouni-Kardani, Ebrahim Ganji Moghadam, Shadi Attar, Mansour Salati
Abstract
Prune dwarf virus (PDV) from the genus Ilarvirus and the family Bromoviridae is a significant pathogen in cherry trees (Prunus avium L.) and causing serious damage to stone fruit trees. In spring 2022, samples showing symptoms including dwarfism, spotted fruits, decreased growth of buds and young shoots with short internodes in compared to healthy plants. were collected from cherry orchards in Golmakan, Khorasan Razavi Province. To detect PDV, a reverse transcription polymerase chain reaction assay was employed using specific primers targeting the movement protein of the virus. The amplified 756 in size nucleotide fragment of the Golmakan isolate was purified and Sanger sequenced. The obtained sequence was compared to available GenBank sequences using BLAST tool in NCBI database. Results indicated that the Golmakan isolate of PDV shared the highest nucleotide identity (99.7%) with the Bulgarian strain (MT152176), while the lowest identity (88.8%) was observed with the Netherlands strain (HM021231). A phylogenetic tree based on the movement protein was constructed, and the PDV strains were classified into two distinct groups, comprising the Golmakan isolate within the Group I. Furthermore, comparison of the movement protein sequences showed that amino acid sequences of the movement protein and the RNA-binding domain of the movement protein are highly conserved among the PDV isolates. In the current research, PDV was reported for the first time in Iran (GenBank accession OR541106), originating from a cherry garden and phylogenetic analysis of PDV was conducted, with a specific focus on the movement protein gene.
Keywords
Movement protein, Prunus Spp, Phylogenetic tree, RT-PCR