بهبود ویژگی‌های دانه‌های آلژینات کلسیم به‌عنوان فرمولاسیون نماتودهای بیمارگر حشرات
پذیرفته شده برای پوستر
کد مقاله : 1764-25IPPC (R1)
نویسندگان
1دانشکاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران
2دانشگاه فردوسی
چکیده
دانه‌های آلژینات کلسیم یکی از مواد مورد استفاده برای فرمولاسیون و نگه‌داری نماتدهای بیمارگر حشرات به‌شمار می‌روند. این مطالعه، نرخ بقا، نرخ تولیدمثل و میزان آلوده‌کنندگی لاروهای عفونت‌زای نماتد را در طول زمان (1 تا 180 روز پس از فرمولاسیون) ارزیابی کرد. نماتدهای فرموله شده عبارت بودند از Heterorhabditis bacteriophora، Steinernema carpocapsae و S. feltiae. فرمولاسیون در حجم 05/3 میلی‌لیتر تولید شد که شامل 2 میلی‌لیتر آلژینات سدیم (5/1 و 75/1 درصد)، 2/0 میلی‌لیتر گلیسرین، 8/0 میلی‌لیتر سوسپانسیون نماتد در آب استریل (به‌طور تقریبی 15000 لارو عفونت‌زای نماتد) و 50 میکرولیتر رنگ خوراکی بود. علاوه‌بر این ترکیبات، 015/0 گرم از دو ترکیب جذب کننده‌ی آب نیز به‌سوسپانسیون اضافه شد که انحصاری هستند. سوسپانسیون حاصل در محلول 30 میلی مولار CaCl2 (به‌نسبت 8:2, CaCl2:glycerin) توسط سرنگ چکانده شده تا دانه‌های آلجینات کلسیم تشکیل شوند. این دانه‌ها در دو دمای 8 و 25 درجه‌ی سلسیوس داخل پلاستیک زیپ کیپ نگه‌داری شدند. لاروهای عفونت‌زای مربوط به تیمار شاهد در آب استریل نگه‌داری شدند. نتایج نشان داد نرخ بقای لاروهای عفونت‌زای نماتد در دانه‌های تشکیل شده نسبت به تیمار شاهد بیشتر بود. در حالی‌که درصد بقا در طول زمان کاهش یافت. نرخ بقا در H. bacteriophora در دمای 25 درجه‌ی سلسیوس نسبت به 8 درجه‌ی سلسیوس بیشتر بود. درحالی‌که در نماتد S. carpocapsae نرخ بقا در 8 درجه‌ی سلسیوس بیشتر بود. برای نماتد S. feltiae هر دو دما نتایج یکسانی داشت. میزان آلوده‌کنندگی نماتدهای بیمارگر حشرات در طول زمان کاهش پیدا نکرد. روش استفاده از دانه‌های آلژینات کلسیم به این صورت بود که 10 دانه‌ی آلژینات کلسیم به 4 میلی‌لیتر آب منتقل شدند. هر دانه به‌طور تقریبی در طول 24 ساعت 400 میکرولیتر آب جذب کرد و حجم آن دو برابر شد. به‌دنبال افزایش حجم، در دانه‌ها شکاف‌هایی ایجاد شد که خروج لاروهای عفونت‌زا از داخل دانه‌ها را تسهیل می‌کرد. دانه‌های آلجینات کلسیم برای نگه‌داری نماتدهای بیمارگر حشرات در دمای اتاق به‌مدت 3 ماه مناسب هستند. انجام تحقیقات تکمیلی می‌تواند در بهبود عملکرد این فرمولاسیون و کاربرد اقتصادی آن موثر باشد.
کلیدواژه ها
Title
Enhanced Calcium‑alginate beads properties as a formulation of entomopathogenic nematodes
Authors
Reyhaneh Darsouei, Javad Karimi
Abstract
Alginate calcium beads are one of the substrates used to formulate and store the infective juveniles (IJs) of entomopathogenic nematodes (EPNs). This study, surveyed the survival rate, reproduction rate, and infectivity of IJs over the time (1-180 day post-formulation). EPNs species formulated were Heterorhabditis bacteriophora, Steinernema carpocapsae and S. feltiae. The formulation was made in a volume of 3.050 ml that included 2 ml sodium alginate (1.5-1.75%), 0.2 glycerin, 0.8 ml nematode suspension in distilled water (~15000 IJs) and 50 µl eatable color. Moreover, 0.015 grams of two water-absorbent compounds added to the suspension is patent. Suspension was dropped in 30mM CaCl2 (8:2 CaCl2: glycerin) which formed calcium alginate beads. The beads were stored at two temperatures (8 and 25ºC). Control treatment was kept in sterile water. The survival rate of IJs at beads formed was more than those control treatment. While survival percentage decreased over time. The survival rate in H. bacteriophora at 25ºC was more than 8ºC. In S. carpocapase at 8ºC was more than 25º C and in S. feltiae both temperatures were the same. The pathogenicity of EPNs did not decrease over time. The method of using calcium alginate beads is as follows: Ten calcium alginate beads were transferred into the 4 ml sterile water. One bead absorbed ~400 µl water and its volume doubled during 24 hours. As a result of their swelling, the beads took a gap, so the IJs emergence was facilitated. Sodium alginate beads are suitable for keeping nematodes at room temperature for up to 3 months. Conducting additional research can be effective in improving the performance of this formulation and its economic application.
Keywords
Sodium alginate, biological control, Insect pathology, microbial control, Mass production