بررسی مقدماتی عوامل خشکیدگی سرشاخه درختان میوه گرمسیری از جنوب شرق ایران
پذیرفته شده برای پوستر
کد مقاله : 1889-25IPPC (R1)
نویسندگان
1بخش تحقیقات گیاهپزشکی، مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی بلوچستان (ایرانشهر)، سازمان تحقیقات و آموزش و ترویج کشاورزی، ایرانشهر، ایران
2بخش گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه جیرفت، جیرفت، ایران
3بخش تحقیقات بیماریهای گیاهی، موسسه تحقیقات گیاهپزشکی کشور، تهران، ایران
4بخش تحقیقات گیاهپزشکی، مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی کرمان، سازمان تحقیقات و آموزش و ترویج کشاورزی، کرمان، ایران
چکیده
سیستان و بلوچستان و کرمان از مهمترین استانهای تولید کننده میوههای گرمسیری در کشور میباشند. در سالهای اخیر، وقوع بیماری خشکیدگی سرشاخه درختان میوه گرمسیری شامل کنار، چیکو و گواوا باعث وارد شدن زیان اقتصادی قابل توجهی به کشاورزان این منطقه شده است. این تحقیق با هدف جداسازی و شناسایی قارچ ها و بررسی نقش آنها در ایجاد خشکیدگی سرشاخه در استانهای سیستان و بلوچستان و کرمان انجام شد. در این پژوهش، طی سالهای 1401 و 1402 نمونه برداریهای متعددی از سرشاخه های دارای علائم خشکیدگی درختان کنار، چیکو و گواوا در استانهای سیستان و بلوچستان و کرمان صورت گرفت. جداسازی قارچ ها روی محیط کشت های PDA انجام شد. در مجموع، 213 جدایه قارچی (183 جدایه متعلق به شش جنس قارچی و 30 جدایه دارای رشد میسلیومی) از سرشاخه درختان دارای نشانههای خشکیدگی سرشاخه جداسازی و به روش ریخت شناختی مورد شناسایی قرار گرفتند. در نهایت 15 جدایه قارچی از جدایههای دارای ویژگیهای ریختشناختی متفاوت به منظور انجام استخراج دی ان ای و تعیین ترادف نوکلئوتیدی انتخاب شدند. برای تایید شناسایی ریخت شناختی از تعیین ترادف ناحیه ریبوزومی فاصله انداز رونویسی شونده داخلی (ITS-rDNA) و بخشی از ژن های بتاتوبولین (tub) و فاکتور طویل سازی ترجمه 1-آلفا (tef-1α) استفاده شد. واکاویهای فیلوژنتیکی برای جدایههای جنس Didymella از ناحیه ژنی ITS-rDNA و tef -1α، برای جدایههای جنس Lasiodiplodia از ناحیه ژنی ITS-rDNA و tub، برای جدایههای Neopestalotiopsis از نواحی ژنی ITS-rDNA، tub و tef -1αو برای جدایههای Neocosmospora از ناحیه ژنی tef -1α به روش Maximum Parsimony صورت گرفت. ترادف نوکلئوتیدی ناحیه ژنی ITS-rDNA در بانک ژن ثبت و شماره دسترسی اخذ شد. گونههای شناسایی شده در اغلب مکانهای مورد بررسی شامل Didymella porsopidis (accession number: PQ179755)، D. chlamydospora (accession number: PQ179754)، (accession number: PQ179756) D. longicola، Neocosmospora solani، Lasiodiplodia theobromae (accession number: PQ179757) و Neopestalotiopsis sp. (accession number: PQ179758 ) بود. آزمون بیماریزایی برای برخی از جدایههای منتخب انجام پذیرفت. نتایج نشان داد جدایههای قارچی به دست آمده از درختان گواوا باعث بیماریزایی روی نهالهای 3 تا 6 ماهه گواوا را در شرایط گلخانه دارند. همچنین جدایههای قارچی به دست آمده از درختان کنار تنها در محل تلقیح باعث ایجاد علائم بافت مردگی و زردی برگ در برخی از نهالهای یکساله کنار شدند و جدایههای قارچی به دست آمده از درختان چیکو توانایی ایجاد بیماری روی نهالهای 6 ماهه چیکو را نداشتند.
کلیدواژه ها
Title
Preliminary survey of fungal agents of the die-back symptoms of tropical fruit trees from Southeast Iran
Authors
َAdel Pordel, Amirreza Amirmijani, Mousa Najafinia, Mahdi Azadvar
Abstract
Sistan and Baluchistan and Kerman are among the most important Provinces producing tropical fruits in Iran. Over the past few years, the die-back disease affecting tropical fruit trees such as Christ's thorn jujube, Chico, and Guava has led to significant financial losses for farmers in the region. This study aimed to isolate and identify fungi and investigate their role in causing die-back in Sistan and Baluchistan and Kerman Provinces. Throughout 2022 and 2023, multiple samples were collected from branches showing signs of die-back in Christ's thorn jujube, Chico, and Guava trees. Fungi were isolated on PDA cultures. A total of 213 isolates (183 isolates belonging to six fungal genera and 30 isolates with mycelium growth/as non-spore producing fungi) were isolated from the branches of trees with die-back and identified by microbiological methods. Finally, 15 fungal isolates with different morphological characteristics were selected for DNA extraction and nucleotide homology determination. To confirm the morphological identification, sequencing of ITS1-5.8S-ITS2 (ITS-rDNA), ß-tubulin (tub), and Translation elongation factor-1α (tef-1α) genomic regions was used. Phylogenetic analysis for Didymella isolates using ITS-rDNA and ef-1α gene regions, for Lasiodiplodia isolates using ITS and tub gene regions, for Neopestalotiopsis isolates from ITS-rDNA gene regions, tub and tef-1α and Neocosmospora isolates from ef-1α gene region was done by Maximum Parsimony method. The nucleotide sequence of the ITS-rDNA gene region was registered in the Genebank and the accession number was obtained. The species identified in most studied locations include Didymella porsopidis (accession number: PQ179755), D. chlamydospora (accession number: PQ179754), D. longicola (accession number: PQ179756), Neocosmospora solani, Lasiodiplodia theobromae (accession number: PQ179757), and Neopestalotiopsis sp. (accession number: PQ179758). The pathogenicity tests were carried out for some selected isolates. Results showed that the isolates obtained from the Guava trees were pathogenic to 3-6 months old guava seedlings under greenhouse conditions. In addition, the isolates obtained from the one-year-old Christ's thorn jujube trees only caused symptoms at the inoculation site and necrosis and yellowing in some seedling leaves were eliminated. Fungal isolates obtained from 6-month Chico trees were non-pathogenic under greenhouse conditions.
Keywords
Chico, Christ's thorn jujube, Guava, Southeast of Iran