شناسایی باکتری Wolbachia در زنبور عسل Apidae) ) Apis mellifera و انگل خارجی آن(Varroidea) Varroa destructor بر اساس واکنش زنجیره ای پلیمراز

پذیرفته شده برای پوستر
کد مقاله : 2031-25IPPC (R1)
نویسندگان
1ندارد
2عضو هیئت علمی
چکیده
Wolbachia فراوان‌ترین جنس باکتری داخل سلولی است که طیف وسیعی از بندپایان را آلوده می‌کند و باعث ایجاد طیف گسترده ای از اثرات فنوتیپی مانند ناسازگاری سیتوپلاسمی، القای بکرزایی، ماده سازی و نرکشی می‌شود. . این باکتری در کلونی های حشرات اجتماعی هم به وفور یافت شده و اثرات مخربی به بار می آورد. در مورد بسیاری از حشرات اجتماعی، زندگی در کلنی منجر به فعل و انفعالاتی می شود که پراکندگی همزیست را تسهیل می کند. با این حال، داشتن تنها یک کاست مسئول تولید مثل (ملکه) می تواند عفونت ها را محدود کند. زنبور عسل به عنوان یکی از حشرات اجتماعی به این باکتری آلوده می شود. در تحقیقی که طی سال‌های 1403-1402 انجام شد، کارگران زنبور عسل و همچنین کنه V. destructor از زنبورستان های استان های کرمان، فارس، اصفهان، سیستان و بلوچستان جمع آوری شدند. پس از استخراج DNA از زنبور ها و کنه ها ، ژن های 16s rRNA و wsp تکثیر شده و نمونه های مثبت آلوده به ولباخیا برای شناسایی توالی یابی شدند. نتایج توالی بابی نشان داد آلودگی باکتریایی ولباخیا در هر دو جمعیت زنبور عسل Apis mellifera و همچنین کنه V. destructor وجود دارد. بسته به اینکه از پرایمرهای تکثیر کننده ژن wsp یا 16s rRNA استفاده شده باشد، نتایج متفاوتی به دست آمد. کنه‌های آزمایش شده برای عفونت این باکتری با استفاده از پرایمر wsp نسبت به آنهایی که با پرایمر 16s rRNA آزمایش شدند، در فرکانس‌های بسیار پایین‌تری از آلوذگی قرار گرفتند. این نتیجه با مطالعات قبلی همخوانی دارد زیرا wsp در برخی سیستم‌های میزبانی به ‌ویژه زمانی که مقدار آلوذگی باکتری پایین است، نتایج منفی کاذب تولید می‌کند. توالی های به دست آمده در حال ثبت در بانک ژن می باشند. این باکتری برای اولین بار از کنه واروا در ایران گزارش می شود. نتایج این تحقیق میتواند در راهبردهای کنترل تلفیقی آفات زنبور عسل مفید باشد.
کلیدواژه ها
 
Title
PCR- based detection of Wolbachia in the honeybee Apis mellifera and its ectoparasite Varroa destructor
Authors
Zahra Hajializadeh, Mahdieh Asadi
Abstract
Wolbachia is the most abundant genus of intracellular bacteria that infects a wide range of arthropods and causes a wide range of phenotypic effects such as cytoplasmic incompatibility, parthenogenesis, feminization, and male-killing. This bacterium is abundantly found in social insect colonies and produces destructive effects. In the case of many social insects, living in a colony leads to interactions that facilitate symbiotic dispersal. However, having only one caste responsible for reproduction (the queen) can limit infections. As one of the social insects, the honey bee is infected with this bacterium. In a research conducted during 1402-1403, honey bee workers and V. destructor mites were collected from apiaries in Kerman, Fars, Isfahan, Sistan and Baluchistan provinces. After DNA extraction from bees and mites, 16s rRNA and wsp genes were amplified and positive samples infected with Wolbachia were sequenced for identification. The results of sequencing showed that Wolbachia bacterial contamination is present in both bee populations and Varroa mites. Different results were obtained depending on whether wsp or 16s rRNA gene amplification primers were used. mites tested for infection with this bacterium using the wsp primer were infected at much lower frequencies than those tested with the 16s rRNA primer. This result is consistent with previous studies because wsp produces false negative results in some host systems, especially when the amount of bacterial contamination is low. The obtained sequences are being registered in the gene bank. This bacterium is reported for the first time from Varroa mites in Iran. The results of this research can be useful in integrated control strategies of bee pests.
Keywords
16S rRNA, wsp, PCR, Primer, Sequence